Цели модуля
• Знать: основные условия культивирования бактерий.
• Уметь: выделять чистую культуру бактерий.
• Владеть: методами посева на плотные и жидкие питательные среды.
3.1. УСЛОВИЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БАКТЕРИЙ
Культивирование микроорганизмов проводят с различными целями: для выделения и изучения свойств возбудителя при диагностике инфекционных заболеваний, накопления биомассы при приготовлении вакцин и диагностикумов и др. Культивирование бактерий возможно лишь при создании определенных условий для их жизнедеятельности. Для этого необходимо соблюдать ряд условий.
• Наличие полноценной питательной среды.
• Температуру культивирования, которая влияет на скорость размножения. По отношению к температуре роста бактерии разделяют на три основные группы - психрофилы, мезофилы и термофилы.
— Психрофилы живут и размножаются при пониженных температурах (от -10 до 20 °С).
— Мезофилы включают бактерии, температурный диапазон роста которых находится между 10 и 45 °С. Оптимальная температура для их культивирования - 25-37 °С.
— Термофилы способны расти при повышенных температурах (42-50 °С).
Для поддержания требуемой температуры используют специальные приборы - термостаты.
• Атмосферу культивирования.
— Для роста и размножения строгих аэробов необходим кислород. Аэробы хорошо растут на поверхности агара на чашках Петри или в тонком верхнем слое жидкой среды. Факультативные анаэробы культивируют в аналогичных условиях.
— Микроаэрофилы, нуждающиеся в пониженной концентрации кислорода, культивируют в атмосфере 5% СО2 в специальных СО2-инкубаторах либо посевы помещают в эксикаторы, в которых устанавливают горящую свечу.
— Облигатные анаэробы для своего роста и размножения требуют исключения доступа кислорода воздуха.
• Время культивирования зависит от времени генерации. Большинство бактерий культивируют для получения видимого роста в течение 18-48 ч. Для ряда бактерий требуются более длительные сроки культивирования.
• Освещение. Для выращивания фототрофных микроорганизмов необходим свет. Некоторые условно-патогенные микобактерии в зависимости от освещенности образуют пигмент, что используют при их идентификации.
• Условия, исключающие попадание других видов бактерий: использование стерильной посуды и стерильных питательных сред.