Этиологическая верификация коронавирусной инфекции проводится на основании выявления:
- РНК SARS-CoV-2 с применением ПЦР-диагностики — методов амплификации нуклеиновых кислот — «золотого стандарта» диагностики;
- антигена SARS-CoV-2 c применением иммунохроматографических методов — используется как экспресс-диагностика — скрининг-тест;
- иммуноглобулинов классов А, M, G (IgА, IgM и IgG) к SARS-CoV-2 (в том числе к рецептор-связывающему домену поверхностного гликопротеина) — имеет ретроспективное значение, так как IgM- и IgG-антитела к SARS-CoV-2 появляются только на 2-й неделе болезни.
Современные способы диагностики инфекционных заболеваний определяют либо присутствие фрагментов вирусов в материале, либо наличие иммунного ответа организма к инфекции (табл. 3). Полимеразную цепную реакцию в реальном времени применяют для диагностики COVID-19 чаще всего. Такой высокочувствительный тест показывает присутствие в исследуемом образце фрагмента генома SARS-CoV-2. Результаты полимеразной цепной реакции в реальном времени зависят от материала, из которого выделяли геном вируса, а также от периода развития инфекции. Исследования с использованием вирусных культур показывают, что, хотя пациенты могут оставаться носителями SARS-CoV-2 в течение нескольких недель после появления симптомов, живой вирус нельзя культивировать из образцов, собранных позднее, чем через 9 дней после появления симптомов. Это позволяет предположить, что средний период контагиозности и риск передачи могут быть ограничены. В период между 2-м и 3-м днями до и 8-м днем после появления симптомов (Peeling et al., 2022) получение истинно положительных результатов полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени является наиболее вероятным. Серологические тесты для выявления иммунного ответа пациента на инфекцию обычно используются не ранее, чем через 7 и более дней после появления клинических симптомов COVID-19.
Таблица 3. Преимущества и недостатки диагностических тестов на инфекцию SARS-CoV-2 у пациентов COVID-19 (Peeling et al., 2022, с модификациями)
| Тип теста | Цель | Преимущества | Недостатки |
| Первые 2 нед после появления симптомов |
| Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в реальном времени (назофарингеальные или назальные пробы) | Детекция РНК вируса | Наиболее чувствительный и специфичный метод | Относительная дороговизна; для выполнения анализа необходимы квалифицированный персонал и дорогостоящее оборудование; получение результатов анализа может занять 24–48 ч |
| Антигенный тест (назофарингеальные или назальные пробы) | Детекция вирусного белка | Относительная дешевизна; быстрота анализа (15–20 мин); для выполнения анализа не требуются квалифицированный персонал и дорогостоящее оборудование | Низкая чувствительность метода |
| Более чем 2 нед после появления симптомов |
| Тест на наличие антител к SARS-CoV-2 в крови пациента | Ретроспективная диагностика инфекции | Получение результата теста в течение 24 ч | Возможны ложно-положительные результаты |
| Несмотря на клиническую симптоматику, результаты стандартных лабораторных тестов отрицательные |
| Повторение стандартных лабораторных тестов на биологическом материале из нижних дыхательных путей (мокрота, бронхоальвеолярный лаваж, аспират из трахеи) | Подтверждение клинического диагноза | – | – |
Серологические методы диагностики показывают наличие в организме человека специфических антител к вирусу. Антитела класса IgM образуются во время острой фазы инфекции. Антитела класса IgG необходимы для возникновения длительного иммунитета после перенесенной инфекции. Среди серологических методов диагностики COVID-19 чаще всего применяют иммуноферментный анализ [28, 29]. Обнаружение в образце сыворотки крови IgM может свидетельствовать как о текущей инфекции, так и о недавно перенесенной болезни. Обнаружение в образце сыворотки крови IgG свидетельствует о перенесенной инфекции. При анализе сывороток крови 285 пациентов с COVID-19 было показано, что у всех больных на 19-й день после появления симптомов в сыворотке крови присутствовали антитела класса IgG к SARS-CoV-2 (рис. 6). При этом наблюдали все три возможных варианта сероконверсии: одновременное появление антител классов IgG и IgM, более раннее появление антител класса IgG, более раннее появление антител класса IgM.
&hide_Cookie=yes)
Рис. 6. Выделение вируса и серологический ответ при SARS-CoV-2-инфекции